New Pharmacy Faculty Enculturation to Facilitate the Integration of Pharmacy Disciplines and Faculty Retention
肺癌患者肺炎衣原体IgG阳性与放射性肺损伤相关细胞因子的关系
张文熠 乔田奎 周道安 袁素娟
作者单位：200540 上海，复旦大学附属金山医院放射肿瘤科（张文熠，乔田奎，袁素娟）；200433 上海，同济大学上海肺科医院放射治疗科（周道安）（通讯作者：乔田奎，E-mail: qiaotk@yahoo.com.cn）
本研究受上海市卫生局基金项目（No.2007101）资助
摘要
Jump to Section
Top
摘要
Abstract
1 材料与方法
2 结果
3 讨论
参考文献
【摘要】背景与目的 肺炎衣原体感染与肺癌有密切关系，但肺炎衣原体感染对肺癌放射性肺损伤的影响尚未见报道。本研究旨在探讨肺癌患者肺炎衣原体（chlamydia pneumoniae, Cpn）IgG阳性对放射性肺损伤相关细胞因子的影响。方法 观察有病理诊断、初次胸部放疗肺癌患者69例，分别于放疗前、放疗中和放疗后采血冻存，采用酶联免疫吸附法检测血液中Cpn的IgG以及IL-1β、SP-A、TGF-β、TNF-α的含量。结果 69例肺癌患者中Cpn IgG阳性21例，阴性48例，阳性率为30.43%。Cpn IgG阳性组与阴性组放疗中IL-1β浓度分别为（35.82±10.09）ng/L和（30.01±6.46）ng/L，两组之间有差异无统计学意义（P<0.05），放疗前和放疗后无明显差异。Cpn IgG阳性组与阴性组放疗前SP-A的浓度差异无统计学意义，放疗中分别为（641.78±106.81）ng/L和（100.86±61.4）ng/L，有统计学差异（P<0.05），放疗后浓度分别（657.47±115.19）ng/L和（93.23±47.15）ng/L，也有统计学差异（P<0.05）。Cpn IgG阳性组与阴性组放疗前、放疗中、放疗后TNF-α浓度两组之间均无统计学差异。Cpn IgG阳性组放疗前、放疗中、放疗后TGF-β1的浓度分别（710.67±358.16）pg/mL、（1,002.06±542.16）pg/mL和（2,125.16±1,522.29）pg/mL，阴性组分别为（867.77±412.48）pg/mL、（914.05±425.70）pg/mL和（1,073.36±896.01）pg/mL，两组之间比较放疗后TGF-β1浓度有统计学差异（P<0.05）。结论 肺癌患者Cpn IgG阳性一定程度上提高了放射性肺损伤相关细胞因子SP-A、TGF -β1、IL-1β的水平，提示可能加重肺癌患者的放射性肺损伤。
【关键词】肺炎衣原体；放射性肺损伤；细胞因子
【中图分类号】R734.2 DOI: 10.3779/j.issn.1009-3419.2011.02.05
Abstract
Jump to Section
Top
摘要
Abstract
1 材料与方法
2 结果
3 讨论
参考文献
Correlation between Chlamydia Pneumoniae IgG Positive in Lung Cancer Patients and Cytokines Related to Radiation-induced Pulmonary Lesion
Wenyi ZHANG1, Tiankui QIAO1, Daoan ZHOU2, Sujuan YUAN1
1Department of Radiation Oncology, Jinshan Hospital, Fudan University, Shanghai 200540, China; 2Department of Radiation Therapy, Shanghai Pulmonary Hospital, TongJi University, Shanghai 200433, China
Corresponding author: Tiankui QIAO, E-mail: qiaotk@yahoo.com.cn
【Abstract】Background and objective There exsits intimate relationship between infection with chlamydia pneumoniae (Cpn) and lung cancer incidence. But few studies have been reported about radiation-induced pulmonary lesion in lung cancer patients infected with Cpn. The aim of this study is to explore the correlation between cytokines related to radiation-induced pulmonary lesion and Cpn IgG positive in lung cancer patients. Methods A total of 69 patients with lung cancer received chest radiotherapy. Blood samples were collected and frozen before radiotherapy (pre-RT), middle radiotherapy (mid-RT) and after radiotherapy (post-RT). Cpn IgG and levels of IL-1β, SP-A, TGF-β, and TNF-α were measured by enzymelinked immunosorbent assay (ELISA). Results In the total of 69 patients, 21 patients were Cpn IgG positive, 48 patients negative. The positive rate was 30.43%. In mid-RT concentration of IL-1β in Cpn IgG positive and negative group were (35.82±10.09) ng/L and (30.01±6.46) ng/L, with statistically significant difference (P<0.05). Pre-RT and post-RT concentrations of IL-1β in Cpn IgG positive and negative group had no statistically significant difference. Mid-RT concentrations of SP-A in Cpn IgG positive group and negative group were (641.78±106.81) ng/L and (100.86±61.4) ng/L respectively, with statistically significant difference (P<0.05). Post-RT concentration of SP-A in Cpn IgG positive and negative group were (657.47±115.19) ng/L and (93.23±47.15) ng/L respectively, with statistically significant difference (P<0.05). Concentrations of TNF-α in Cpn IgG positive and negative group had no statistically significant difference. Concentrations of TGF-β in Cpn IgG positive group were (710.67±358.16) pg/mL in pre-RT, (1,002.06±542.16) pg/mL in mid-RT, (2,125.16±1,522.29) pg/mL in post-RT; those in negative group were (867.77±412.48) pg/mL, (914.05±425.70) pg/mL, (1,073.36±896.01) pg/mL. Concentration of TGF-β in post-RT between Cpn IgG positive and negative group had statistically significant difference (P<0.05). Conclusion Cpn IgG positive in lung cancer patients influenced levels of IL-1β, SP-A, TGF-β during chest radiotherapy. This might aggravate radiation-induced pulmonary lesion.
【Key words】Chlamydia pneumoniae; Radiation-induced pulmonary lesion; Cytok
This study was supported by a grant from Project of Shanghai Municipal Health Bureau (to Tiankui QIAO)(No.2007101).
放射性肺损伤是肺癌放射治疗的主要并发症，也是影响肺癌患者预后重要因素之一。近些年研究发现肺炎 衣原体（chlamydia pneumoniae, Cpn）感染与肺癌密切相 关[1-8]，但肺炎衣原体感染对肺癌放射性肺损伤的影响未 见报道。本研究于2008年1月-2009年12月检测了初次接 受放射治疗的肺癌患者的Cpn IgG阳性情况，并检测放射 性肺损伤的相关细胞因子，初步观察肺癌患者Cpn IgG阳 性与放射性肺损伤的关系。
1 材料与方法
Jump to Section
Top
摘要
Abstract
1 材料与方法
2 结果
3 讨论
参考文献
1.1 研究对象
收集我院2008年1月-2009年12月间接受根 治性放疗、有明确病理诊断的肺癌患者69例，其中男性 患者57例，女性患者12例，本实验所有患者均签署知情 同意书。69例肺癌患者在本实验之前未做过Cpn相关检 查，无Cpn感染的急性或慢性症状及体征。所有患者分 别于放疗前（开始放疗前1天）、放疗中（放射剂量达 到30 Gy时）、放疗后（放射治疗结束时）采3次空腹血 4 mL-5 mL，3,000 r/min，离心5 min，分离血浆，置于-35 oC保存待测。
1.2 治疗方式
6 MV直线加速器，X射线，采用常规分割 方式，一天一次，一次1.8 Gy-2.0 Gy，每周5次。患者在 三维TPS上进行设计计划，勾画靶区，95%的等剂量曲线 包绕PTV。CTV包括原发灶（病灶外缘1 cm-2 cm）和区 域淋巴结引流区，照射至40 Gy，复查胸部CT，改野或 缩野。放疗总剂量50 Gy-60 Gy。肺受照20 Gy体积占全肺 百分比（V20）≤20%，脊髓受照量<45 Gy。
1.3 Cpn IgG检测
Cpn IgG ELISA试剂盒购自美国R&D公 司。先检测患者放射治疗前血浆中Cpn的IgG：设5个标 准品孔，加标准品50 μL并梯度稀释，设2个空白孔，在 样品孔先加样品稀释液40 μL，再加样品10 μL，在37 oC水 箱温育1 h，弃液，洗板5次，加酶，在37 oC水箱温育30 min，弃液，洗板5次，先后加显色剂A和B，在37 oC水箱 温育15 min，加终止液，450 nm波长比色。
1.4 细胞因子检测
IL-1β、SP-A的ELISA试剂盒均购 自美国R&D公司；TNFα、TGFβ的试剂盒购自美国EBIOSCINECE公司。检测方法同Cpn检测。
1.5 统计学分析
统计方法采用SPSS 16.0软件进行统计分 析。所有计量资料组间比较采用t检验。计数资料分析采 用卡方检验。P<0.05为差异具有统计学意义。
2 结果
Jump to Section
Top
摘要
Abstract
1 材料与方法
2 结果
3 讨论
参考文献
2.1 Cpn IgG阳性率
入组观察的肺癌患者共69例，治疗前 检测Cpn IgG阳性21例，阴性48例，肺癌患者Cpn IgG阳 性率为30.43%。Cpn IgG阳性组与阴性组患者的性别、年 龄、吸烟史、病变分型、病理分类、临床分期、KPS等 一般情况无明显差异（P>0.05）（表1）。
2.2 Cpn IgG阳性与细胞因子的含量
Cpn IgG阳性组与阴 性组之间放疗前、放疗中、放疗后IL-1β的含量进行比 较发现，放疗中（治疗第4周）Cpn IgG阳性组与阴性组 相比IL-1β的含量差异有统计学意义（P<0.05）；放疗 前、放疗后IL-1β含量未见明显差异（P>0.05）。放疗前 Cpn IgG阳性组SP-A的含量高于阴性组，但无统计学差 异（P>0.05）。Cpn IgG阳性组放疗中SP-A的含量较阴性 组明显增高，两组之间差异有统计学意义（P<0.05）， Cpn IgG阳性组放疗后SP-A的含量升高，与阴性组之间 差异有统计学意义（P<0.05）。Cpn IgG阳性组与阴性组 放疗前、中、后TNF-α的含量两组之间均未见明显差异 （P>0.05）。Cpn IgG阳性组放疗中、放疗后TGF-β1较 放疗前明显升高，有明显差异（P<0.05）。Cpn IgG阳性 组与阴性组放疗前、治疗中TGF-β1的含量间无明显差异 （P>0.05）。放疗后Cpn IgG阳性组TGF-β1明显高于阴性 组，有统计学差异（P<0.05）（表2）。
3 讨论
Jump to Section
Top
摘要
Abstract
1 材料与方法
2 结果
3 讨论
参考文献
肺炎衣原体是一种常见的人类呼吸道病原体，既 往对于Cpn的认识往往局限于其可导致社区获得性肺炎 [9]。近年来陆续有临床流行病学资料报道，肺炎衣原体 慢性感染与肺癌的发生发展有关，值得临床重视。检索 到关于肺炎衣原体感染与肺癌关系的临床流行病学的国外文献有8篇[1-8]，均提示Cpn慢性感染与肺癌的发生存在 一定的关联。特别是3篇巢式PCR病例对照研究显示了 Cpn慢性感染与肺癌发生的密切相关性。Littman等[3]在美 国进行的调查研究设计最严谨，论证力度最强，其研究 结果：随着IgA滴度的增加，OR值亦增加。对于一项样 本量达508例且经过严格混杂因素控制的巢式病例对照 研究而言，这一结果是可信的，从临床流行病学角度可以 认为Cpn感染是肺癌的一个危险因素。Koh、Littman等[2,3] 的研究均显示鳞癌与Cpn慢性感染的相关性较其它病理 类型更强（OR值分别为1.42和1.70），且具有统计学意 义。国内文献[10-14]报道肺炎衣原体慢性感染与肺癌发生 有一定相关性，其中周妍等[11]研究Cpn与肺癌的关系， 采用患者的血清及肺癌组织为材料进行研究，通过研究 表明，肺癌组Cpn抗原（Cpn-Ag）表达水平（阳性率为 88%）明显高于对照组，值得临床重视。Cpn的感染可导 致机体产生IgG，血清Cpn抗体的检测有多种方法，如补 体结合、微量免疫荧光（micro-immunofluorescence, MIF） 和ELISA等方法，其中MIF和ELISA法有较高的特异性和 灵敏度[15]。本组观察的肺癌患者共69例，肺癌患者Cpn IgG阳性率为30.43%。Cpn IgG阳性代表当前或近期曾发 生感染[16]，而入选本实验肺癌患者均无Cpn感染的急性 或慢性临床表现，提示这些患者可能为亚临床或隐性的 Cpn感染。Cpn IgG阳性组与阴性组在年龄、性别、吸烟 史、分型、分期、病理、KPS值等方面差异无统计学意 义（P>0.05）。
放射性肺损伤早期为急性炎症，逐步进展为肺纤维 化，在整个过程中肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α, TNF-α）、转化生长因子β1（transforming growth factor, TGF-β1）等细胞因子与细胞及组织损伤关系密切，具 有重要作用[17]。Cpn可被中性粒细胞或吞噬细胞吞噬杀 灭，但有时不但不能杀灭，反而在细胞内繁殖，以其肺 部慢性炎症。其可以刺激炎症细胞释放一系列炎症介 质，如肿瘤坏死因子、白细胞介素等，以及一系列反 应，从而引起肺组织的损伤。肺炎衣原体感染是否会加 重放射性肺损伤，目前未见报道。
放射性肺损伤的相关细胞因子的变化早于临床改 变，并且相对于临床指标，细胞因子更能客观反映情 况。所以本研究通过检测几个与放射性肺损伤相关的因 子，观察肺癌患者Cpn IgG阳性与放射性肺损伤的关系。
白细胞介素-1β（interleukin-1β, IL-1β）是由单核巨噬 细胞产生的细胞因子，具有调节辅助T细胞活化、白细 胞化学吸引、趋化粒细胞、淋巴细胞聚集、巨噬细胞刺激作用的功能。卢秀兰等[18]对病毒感染性肺炎患儿血浆 中的IL-1β进行检测发现IL-1β在急性炎症期水平升高，而 正常人血中不含IL-1β或含量很低。在本研究中，对本组 69例放疗的肺癌患者血中IL-1β的含量进行检测发现，放 疗前和放疗后Cpn IgG阳性组与阴性组的IL-1β的含量差异 无统计学意义（P>0.05）。放疗中两组的IL-1β的含量差 异有统计学意义（P<0.05）。提示Cpn IgG阳性患者有可 能在一定程度上加重放射性肺损伤。
肺表面活性物质相关蛋白（surfactant-associated proteins, SP-A）是肺泡II型上皮细胞和气道Clara细胞合 成并分泌的亲水性蛋白。肺泡II型细胞对放射线很敏 感，肺泡II型细胞受损后可导致肺泡张力变化，肺顺应 性下降，肺泡塌陷和不张[19]。本实验结果显示：放疗前 Cpn IgG阳性组与阴性组的SP-A的含量差异无统计学意义 （P>0.05）。放疗中和放疗后两组的SP-A的含量差异有 统计学意义（P<0.05）。结果提示Cpn IgG阳性可能加重 放射线对肺泡II型细胞的损伤程度。
TNF-α是由单核/巨噬细胞分泌的一种可溶性多肽， 体内细胞因子调节网络的启动因子，是启动炎症反应的 关键细胞因子，在放射性肺炎的发生和维持过程中占有 重要地位。Jaattela[20]认为TNF-α能促进肺部炎症细胞的聚 集，增加巨噬细胞和内皮细胞产生IL-1、TGF-β及其受体 表达，刺激成纤维细胞增殖等，从而加重组织的炎症反 应。臧倩等[21]研究认为血清TNF-α变化有可能成为放射 性肺损伤的预测指标。本实验结果显示：Cpn IgG阳性组 与阴性组的放疗中、放疗后TNF-α的含量较治疗前明显 升高，但两组之间差异无统计学意义（P>0.05）。
TGF-β1是一种多功能细胞因子，可促进胶原蛋白 的分泌以及细胞外基质的沉积，是组织细胞应答放射性 刺激的主要因子，其水平升高已被视为放射性肺损伤的 标志之一[22]。本组结果显示：Cpn IgG阴性组患者放疗 中、放疗后的TGF-β1含量较治疗前都有升高，但差异 无统计学意义（P>0.05）。Cpn IgG阳性组患者放疗后的 TGF-β1含量较放疗前和放疗中也明显升高，并且差异有 统计学意义（P<0.05）。Cpn IgG阳性组与阴性组之间比 较放疗前和放疗中的TGF-β1的含量差异无统计学意义 （P>0.05）。放疗后两组的TGF-β1的含量差异有统计学 意义（P<0.05）。结果提示，Cpn IgG阳性可能影响肺癌 患者肺组织的放射性损伤程度。
综上所述，本组肺癌患者Cpn IgG阳性率达30.43%， 并且一定程度上增加了放射性肺损伤相关细胞因子 SP-A、TGF -β1、IL-1β的含量，提示可能加重肺癌患者的放射性肺损伤，临床方面的相关性还需要进一步深入的 研究证实。
参考文献
Jump to Section
Top
摘要
Abstract
1 材料与方法
2 结果
3 讨论
参考文献
  • Koh WP, Chow VT, Phoon MC, et al. Lack of association between chronic Chlamydophila pneumoniae infection and lung cancer among nonsmoking Chinese women in Singapore. Int J Cancer, 2005, 114(3): 502-504.[LinkOut]
  • Littman AJ, White E, Jackson LA, et al. Chlamydia pneumoniae infection and risk of lung cancer. Cancer Epidemiol Biomarkers Prev, 2004, 13(10): 1624-1630.[LinkOut]
  • Anttila T, Koskela P, Leinonen M, et al. Chlamydia pneumoniae infection and the risk of female early-onset lung cancer. Int J Cancer, 2003, 107(4): 681-682.[LinkOut]
  • Kocazeybek B. Chronic Chlamydophila pneumoniae infection in lung cancer, a risk factor: a case-control study. J Med Microbiol, 2003, 52(Pt 8): 721-726.[LinkOut]
  • Koyi H, Branden E, Gnarpe J, et al. An association between chronic infection with Chlamydia pneumoniae and lung cancer. A prospective 2-year study. APMIS, 2001, 109 (9): 572-580.[LinkOut]
  • Jackson LA, Wang SP, Nazar-Stewart V, et al. Association of Chlamydia pneumoniae immunoglobulin a seropositivity and risk of lung cancer. Cancer Epidemiol Biomarkers Prev, 2000, 9(11): 1263-1266.[LinkOut]
  • Koyi H, Branden E, Gnarpe J, et al. Chlamydia pneumoniae may be associated with lung cancer. Preliminary report on a seroepidemiological study. APMIS, 1999, 107(9): 828-832.[LinkOut]
  • Laurila AL, Anttila T, Laara E, et al. Serological evidence of an association between Chlamydia pneumoniae infection and lung cancer. Int J Cancer, 1997, 74(1): 31-34.[LinkOut]
  • Yen MY, Hu BS, Chen YS, et al. A prospective etiologic study of communityacquired pneumonia in Taiwan. J Formos Med Assoc, 2005, 104(10): 724-730.[LinkOut]
  • Jin Q, Sun SM. Correlation between Chlamydia penumoniae and lung cancer. Clin Med J Chin, 2006, 13(4): 581-583. [金前, 孙书明. 肺炎衣原 体与肺癌的相关性. 中国临床医学, 2006, 13(4): 581-583.]
  • Zhou Y, Sun SM, Hu ZX, et al. Clamydia pneumoniae infection and lung neoplasms. Clin Med J Chin, 2005, 12(1): 44-46. [周妍, 孙书明, 胡志雄, 等. 肺癌与肺炎衣原体感染关系的研究. 中国临床医学, 2005, 12(1): 44-46.]
  • Zhou Y, Yu ZY. Relationship between infection of Chlamydia penumoniaend lung cancer. Strait J Prev Med, 2003, 9(5): 15-16. [周妍, 余竹元. 肺炎衣 原体感染与肺癌的关系. 海峡预防医学杂志, 2003, 9(5): 15-16.]
  • Chen YB, Tao YD, Ling CH, et al. Correlation between infection of chlamydia penumoniae and lung cancer. Jiangsu Med J, 2005, 31(4): 306-308. [陈延斌, 陶岳多, 凌春华, 等. 肺炎衣原体感染与肺癌的相关性. 江苏医药, 2005, 31(4): 306-308.]
  • Chen YQ, Liu LM, Wang FC, et al. Study on Chlamydia pneumoniae infection in patients with lung cancer. Chin J Zoonoses, 2001, 17(3): 46-49. [陈余清, 刘黎明, 王凤超, 等. 肺癌患者肺炎衣原体感染的研究. 中国人兽共患病杂志, 2001, 17(3): 46-49.]
  • Zhang JN, Xiang M, Xin JB, et al. Seroprevalence of chlamydia pneumoniae specific IgG antibody in medical staffs. Chin J Infect Chemother, 2008, 8(1): 20-23. [张劲农, 向敏, 辛建保, 等. 医务人员肺炎衣原体血清IgG抗体 流行病学调查. 中国感染与化疗杂志, 2008, 8(1): 20-23.]
  • Thom DH, Grayston JT, Campell LA, et al. Respiratory infection with Chlamydia pneumoniae in middleaged and older adult outpatients. Eur, J Microbiol Infect Dis, 1994, 13(10): 785-792.[LinkOut]
  • Feng YL, Liu CT ed. Lung Cancer. 1st ed. Beijing: People’ Medical Publishing, 2002. 226-237. [冯玉麟, 刘春涛主译. 肺癌. 第1版. 北京: 人民卫生出版社, 2002. 226-237.]
  • Lv XL, Xiao ZH, Zhu YM, et al. Change and clinic significance of IL-1, IL-6, IL-8 in critically ill children of virus pneumonia. J Clin Res, 2003, 20(12): 948. [卢秀兰, 肖政辉, 祝益民, 等. 病毒感染性肺炎危重患儿血浆 IL-1、IL-6、IL-8的变化及临床意义. 医学临床研究, 2003, 20(12): 948.]
  • Yin WB, Yu ZH, Xu GZ, et al. Radiation oncology. 4nd ed. Beijing: Peking Union Medical College Press, 2008. 636-655. [殷蔚伯, 余子豪, 徐国镇, 等. 肿瘤放射治疗学. 第4版. 北京: 中国协和医科大学出版社, 2008. 636-655.]
  • Jaattela M. Biologic activities and mechanisms of action of tumor necrosis factor-alpha/cachectin. Lab Invest, 1991, 64(6): 724-742.[LinkOut]
  • Zang Q, Yang MH. Observation of serum in terleukin-6 and tumor necros is factor-α levels in rats with lung in jury induced by radiation. Chin J Integr Tradi West Medi Intensive Crit Care, 2007, 14(2): 88-90. [臧倩, 杨明会. 放射性肺损伤大鼠血清白细胞介素-6和肿瘤坏死因子-α的动态变化. 中国中西医结合急救杂志, 2007, 14(2): 88-90.][LinkOut]
  • Fu XL, Huang H, Bentel G, et al. Predicting the risk of symptomatic radiation- induced lung injury using both the physical and biologic parameters V(30) and transforming growth factor beta. Int J Radiat Oncol Phys, 2001, 50(4): 899-908.[LinkOut]


Bookmark and Share